本期著重對 保健食品生產(chǎn)潔凈室（區(qū)）要求及檢測方法進行詳細闡述。
中華人民共和國衛(wèi)生部于1998年05月05日發(fā)布《保健食品良好生產(chǎn)規(guī)范》GB 17405-1998，并于1999年01月01日實施。該標準規(guī)定了對生產(chǎn)具有特定保健功能食品企業(yè)的人員、設(shè)計與設(shè)施、原料、生產(chǎn)過程、成品貯存與運輸以及品質(zhì)和衛(wèi)生管理方面的基本技術(shù)要求。
1、要求：
1.1設(shè)計：保健食品廠的總體設(shè)計、廠房與設(shè)施的一般性設(shè)計、建筑和衛(wèi)生設(shè)施應(yīng)符合GB 14881的要求。
1.2廠房與廠房設(shè)施：
1.2.1廠房應(yīng)按生產(chǎn)工藝流程及所要求的潔凈級別進行合理布局，同一廠房和鄰近廠房進行的各項生產(chǎn)操作不得相互妨礙。
1.2.2必須按照生產(chǎn)工藝和衛(wèi)生、質(zhì)量要求，劃分潔凈級別，原則上分為一般生產(chǎn)區(qū)、10萬級區(qū)。10萬級潔凈級區(qū)應(yīng)安裝具有過濾裝置的相應(yīng)的凈化空調(diào)設(shè)施。廠房潔凈級別及換氣次數(shù)見表1。
表1
潔凈級別
塵埃數(shù)/m3
活微生物數(shù)/m3
換氣次數(shù)/h
≥0.5μm
≥5μm
10000級
≤350000
≤2000
≤100
≥20次
100000級
≤3500000
≤20000
≤500
≥15次
1.3凈化級別必須滿足生產(chǎn)加工保健食品對空氣凈化的需要。生產(chǎn)片劑、膠囊、丸劑以及不能在后容器中滅菌的口服液等產(chǎn)品應(yīng)當采用十萬級潔凈廠房。
1.4潔凈廠房的溫度和相對濕度應(yīng)于生產(chǎn)工藝要求相適應(yīng)。
1.5潔凈級別不同的廠房之間、廠房與通道之間應(yīng)有緩沖設(shè)施。應(yīng)分別設(shè)置與潔凈級別相適應(yīng)的人員和物料通道。
1.6保健食品生產(chǎn)應(yīng)有備料室，備料室的潔凈級別應(yīng)于生產(chǎn)工藝要求一致。
2、檢測方法
2.1溫濕度的檢測
2.1.1 無恒溫恒濕要求的溫濕度檢測應(yīng)符合下列要求；
1 室內(nèi)空氣溫度和相對濕度測定之前，空調(diào)凈化系統(tǒng)應(yīng)已連續(xù)運行至少 8h。
2 溫度的檢測可采用玻璃溫度計、數(shù)字式溫濕度計；濕度的檢測可采用通風式干濕球溫度計、數(shù)字式溫濕度計、電容式濕度檢測儀或露點傳感器等。根據(jù)溫濕度的波動范圍，應(yīng)選擇足夠精度的測試儀表。溫度檢測儀表的亥刻度不宜高于 0.4℃，濕度檢測儀表的刻度不宜高于2%。
測點為房間中間一點，應(yīng)在溫濕度讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。測完室內(nèi)溫濕度后，還應(yīng)同時測出室外溫濕度。
2.1.2 有恒溫恒濕要求房間的溫濕度檢測應(yīng)符合下列要求；
1 選擇以下檢測儀器；
1）溫度計∶采用鉑電阻、熱電偶或其他類似溫度傳感器組成測溫系統(tǒng)；
2）濕度計∶可采用干濕球溫度計或其他固態(tài)濕度傳感器組成測濕系統(tǒng)。
2 檢測方法與步驟如下∶
1）室內(nèi)空氣溫度和相對濕度測定之前，空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)已連續(xù)運行至少12h;
2）根據(jù)溫度和相對濕度波動范圍（表1），應(yīng)選擇相應(yīng)的具有足夠精度的儀表進行測定。根據(jù)由低到高的精度，測定宜連續(xù)進行（8～48）h，每次測定間隔不應(yīng)大于30min;
3）室內(nèi)測點可在送回風口處或在恒溫恒濕工作區(qū)具有代。
表性的地點布置。測點一般應(yīng)布置在距外墻表面大于 0.5m、距地 0.8m 的同一一高度上； 也可以根據(jù)恒溫恒濕區(qū)的大小，分別布置在離地不同高度的幾個平面上。具體測點數(shù)應(yīng)符合表1 的規(guī)定。
表1 有恒溫恒濕要求時的溫、濕度測點數(shù)
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波動范圍 |
室面積≤50m2 |
每增加20～50m2 |
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溫度波動 Δt=±0.5℃～±2℃ |
5 |
增加 3～5個 |
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相對濕度波動 ΔRH=±5%～±10% |
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溫度波動 Δt≤|0.5|℃ |
點間距不應(yīng)大于 2m，點數(shù)不應(yīng)少于5個 |
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相對濕度波動 △RH≤|5|% |
||
2.2風量或風速的檢測應(yīng)符合下列規(guī)定
2.2.1 對于單向流潔凈室，采用室截面平均風速和截面積乘積的方法確定送風量，測點位于過濾器出風面約150mm～300mm，垂直氣流處的截面作為采樣截面，截面上測點間距不宜大于0.6m，測點數(shù)不應(yīng)少于4點，所有讀數(shù)的算術(shù)平均數(shù)作為平均風速。
2.2.2對于非單向流潔凈室，采用風口或風管法確定送風量，可按現(xiàn)行標準《通風與空調(diào)工程施工質(zhì)量驗收規(guī)范》GB 50243規(guī)定的方法執(zhí)行。
2.3 風速不均度的檢測
2.3.1 測定截面、測點數(shù)和測定儀器應(yīng)符合2.3.1.1和2.3.1.2條規(guī)定。測定截面也可按規(guī)定高度確定。
2.3.1.1 測定室內(nèi)微風速儀器的刻度或讀數(shù)不應(yīng)大于0.02m/s，一般可用熱球式風速儀，需要測出分速度時，應(yīng)采用超聲波三維風速計。
2.3.1.2 對于單項流潔凈室，可采用室截面平均風速和截面積乘積的方法確定送風量，垂直單向流潔凈室的測定截面取距地面0.8m的無阻隔面（孔板、格柵除外）的水平截面，如有阻隔面，該測定截面應(yīng)抬高至阻隔面之上0.25m；水平單向流潔凈室取距送風面0.5m的垂直于地面的截面，截面上測點間距不應(yīng)大于1m，一般取0.3m。測點數(shù)應(yīng)不少于20個，均勻布置。
2.3.2測定風速宜用測定架固定風速儀，不得不手持風速儀測定時，手臂應(yīng)伸直至長位置，使人體遠離測頭。
2.4換氣次數(shù)的檢測
2.5靜壓差的檢測應(yīng)符合下列規(guī)定
2.5.1 靜壓差的測定應(yīng)在潔凈室（區(qū)）的風速、風量和送風均勻性檢測合格后進行，并應(yīng)在所有的門窗關(guān)閉時檢測。
2.5.2 儀器宜采用各種微差壓力計，儀表靈敏度應(yīng)小于1.0Pa。
2.6 照度的檢測
2.6.1 室內(nèi)照度的檢測應(yīng)為測定除局部照明之外的一般照明的照度。
2.6.2 室內(nèi)照度的檢測可采用便攜式照度計，照度計的刻度不應(yīng)大于2lx。
2.6.3 室內(nèi)照度必須在室溫趨于穩(wěn)定之后進行，并且熒光燈已用100h以上的使用期，檢測前已點燃15min以上，白熾燈已有10h以上的使用期，檢測前已點燃5min以上。
2.6.4 測點距地面高0.8m，按1m～2m間距布點，30㎡以內(nèi)的房間測點距墻面0.5mm，超過30㎡的房間，測點離墻1m。
2.7 噪聲的檢測
2.7.1 一般情況下可只檢測A聲級的噪聲，必要時可采用帶倍頻程分析儀的聲級計，按中心頻率63、25、250、500、1000、2000、4000、8000Hz的倍頻程檢測，測點附近1m內(nèi)不應(yīng)有反射物。聲級計的刻度不宜低于0.2dB（A）。
2.7.2 測點距地面高1.1m。面積在15㎡以下的潔凈室，可只測室中心1點，15㎡以上的潔凈室除中心1點外，應(yīng)再測對角4點，距側(cè)墻各1m，測點朝向各角。
2.7.3 當為混合流潔凈室時，應(yīng)分別測定單向流區(qū)域、非單向流區(qū)域的噪聲。
2.7.4 有條件時，宜測定空調(diào)凈化系統(tǒng)停止運行后的本底噪聲，室內(nèi)噪聲與本底噪聲相差小于10dB（A）時，應(yīng)對測點值進行修正：相差（6～9）dB（A）時減1dB（A），相差（4～5）dB（A）時減2dB（A），相差3dB（A）時減3dB，相差小于3dB（A）時測定值無效。
2.8 已安裝過濾器檢漏
2.8.1檢漏方法有光度計法和粒子計數(shù)器法。
2.8.2 在過濾器上風側(cè)應(yīng)引入測試用氣溶膠，在過濾器下風側(cè)用光度計或粒子計數(shù)器地等動力采樣頭放在距離被檢過濾器表面2cm～3cm處，以5mm/s～15mmm/s的掃描速度移動，并應(yīng)注意安裝處的掃描。
2.9 密閉性的檢測
密閉性測試應(yīng)用于確認有無被污染的空氣 從相鄰潔凈室（區(qū)）或非潔凈室（區(qū)）通過吊頂、隔墻等表面或門、窗滲漏入潔凈室（區(qū)）。一般使用于1級至5級的潔凈室（區(qū)）進行測試。采用光度計法和粒子計數(shù)器法進行測試。
2.10 潔凈度的檢測
潔凈度的檢測應(yīng)符合下列規(guī)定∶
2.10.1 使用采樣量大于1L/min的光學粒子計數(shù)器，在儀器選用時應(yīng)考慮粒徑鑒別能力、粒子濃度適用范圍和計數(shù)效率。儀器應(yīng)有有效的標定合格證書。
2.10.2 少采樣點數(shù)應(yīng)按下式計算∶
NL= A0.5
式中∶NL——少采樣點；
A——潔凈室或被控潔凈區(qū)的面積（m2）。
2.10.3 采樣點應(yīng)均勻分布于潔凈室或潔凈區(qū)的整個面積內(nèi)，并位于工作活動的高度，活動高度宜距地面0.8m；每個采樣點的采樣時間為1min。
2.10.4 每一采樣點的每次采樣量應(yīng)至少為2L，采樣量應(yīng)按下式計算∶
VS=
式中∶VS——每個采樣點的每次采樣量，以L表示；當VS很大時，可使用順序采樣法；
Cn·m——被測潔凈室空氣潔凈度等級的被測粒徑的限制（pc/m3);
20——在規(guī)定被測粒徑粒子的空氣潔凈度等級限制時，可測到的粒子顆數(shù)（pc）。
2.10.5 當潔凈室或潔凈區(qū)僅有一個采樣點時，則在該點應(yīng)至少采樣3次。
2.11 浮游菌的檢測
浮游菌采樣應(yīng)符合下列要求：
2.11.1 使用單級或多級撞擊式采樣器、離心采樣器或過濾采樣器，采樣必須按所用儀器說明書的步驟進行，特別要注意檢測之前對儀器消毒滅菌，并對培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做陰性對照。
2.11.2 釆樣點數(shù)應(yīng)不少于微粒計數(shù)濃度測點數(shù)。
2.11.3 采樣點應(yīng)在離地0.8m高平面上均勻布置，或經(jīng)委托方（用戶）與檢測方協(xié)商確定。亂流潔凈室內(nèi)不得在送風口正下方布點。靜態(tài)或空態(tài)檢測前對室內(nèi)各種.表面應(yīng)作擦拭消毒。
2.11.4每點采樣1次，如工藝無特殊要求，每次采樣信應(yīng)大于等于表2推薦的浮游菌采樣量。
表2浮游菌采樣量
| 潔凈度級別 |
采樣量（L） |
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5級和高于5級 |
100O |
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6級 |
300 |
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7級 |
200 |
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8級 |
100 |
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9級 |
100 |
每次采樣時間不宜超過15min，不應(yīng)超過30min。
當潔凈度很高，或預期含菌濃度可能很低時，釆樣量應(yīng)大于釆樣量很多，以滿足減少計數(shù)誤差的要求。
2.11.5 采樣器應(yīng)用支架固定，采樣時檢測人員應(yīng)退出，手持離心式采樣器除外。必須手持采樣器時，應(yīng)將手臂伸直，站于下風向。
2.11.6 采樣后宜在2h之內(nèi)將采樣器中的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條送入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.11.7 每點平均值取到小數(shù)點后1位。
2.11.8 動態(tài)監(jiān)測的測點位置、數(shù)量和高度由工藝并經(jīng)協(xié)商確定。每間潔凈室或每一個獨立受控環(huán)境中各點總采樣量，不分級別，均應(yīng)大于1m3。每點可用多臺采樣器。
2.11.9 單點菌落數(shù)太大時，應(yīng)按以下原則處理。
2.11.9.1 作為壞點剔除；
2.11.9.2 重測，如結(jié)果仍大，以兩次平均值為準；如結(jié)果很小，可再重測；
2.11.9.3 重測該處微粒濃度，參考此結(jié)果作出判斷。
所有上述處理方法均應(yīng)記錄在案
2.12 沉降菌的檢測
2.12.1 使用直徑90mm（φ90）的培養(yǎng)皿采樣。當采用其他直徑培養(yǎng)皿時，應(yīng)使其總面積和φ90皿總面積相當。
2.12.2 培養(yǎng)皿中灌注胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基，必須留樣作陰性對照。
2.12.3 培養(yǎng)皿表面應(yīng)經(jīng)適當消毒清潔處理后，布置在有代表性的地點和氣流擾動小的地點。在亂流潔凈室內(nèi)培養(yǎng)皿不應(yīng)布置在送風口正下方。
2.12.4 當用戶沒有特定要求時，培養(yǎng)皿應(yīng)布置在地面及其以上0.8m之內(nèi)的任意高度。
2.12.5 每一間潔凈室或每一個控制區(qū)應(yīng)設(shè)1個陰性對照皿。
2.12.6 動態(tài)監(jiān)測時也可協(xié)商布點位置和高度。
2.12.7 培養(yǎng)皿數(shù)應(yīng)不少于微粒計數(shù)濃度的測點數(shù)，如工藝無特殊要求應(yīng)大于等于表3中的少培養(yǎng)皿數(shù)，另外各加1個對照皿。
表3少培養(yǎng)皿數(shù)
潔凈度級別
所需φ90培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h計）
高于5級
44
5級
13
6級
4
7級
3
8級
2
9級
2
2.12.8 當延長沉降時間時，可按比例減少少培養(yǎng)皿數(shù)，為防止脫水，長沉降時間不宜超過1h，當所需沉降時間超過1h，可重疊多皿連續(xù)采樣。除非經(jīng)過驗證，證明更長的沉降時間可以基本按比例增加菌落數(shù)。
2.12.9 培養(yǎng)皿應(yīng)從內(nèi)向外布置，從外向內(nèi)收皿。
2.12.10 每布置完1個皿，皿蓋只允許斜放在皿邊上，對照皿蓋挪開即蓋上。
2.12.11 布皿前和收皿后，均應(yīng)用雙層包裝保護培養(yǎng)皿，以防污染。
2.12.12 收皿后皿應(yīng)倒置擺放，并應(yīng)及時放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，在培養(yǎng)箱外時間不宜超過2h。如無標準規(guī)定，對于檢測細菌總數(shù)，培養(yǎng)溫度采用（35～37）℃，培養(yǎng)時間為（24～48）h；對于檢測真菌，培養(yǎng)溫度（27～29）℃，培養(yǎng)時間3d。
2.12.13 布皿和收皿的檢測人員必須穿無菌服，但不得穿大褂。頭、手均不得裸露，褲管應(yīng)塞在襪套內(nèi)，并不得穿拖鞋。
2.12.14 對培養(yǎng)后的皿上菌落計數(shù)時，應(yīng)采用5～10倍放大鏡查看，若有2個或更多的菌落重疊，可分辨時則以2個或多個菌落計數(shù)。
2.12.15 當單皿菌落數(shù)太大受到質(zhì)疑時，可按以下原則之一進行處理：
1）作為壞點剔除；
2）重測，如結(jié)果仍大，以兩次平均值為準；如結(jié)果很小，可再重測；
3）重測該處微粒濃度，參考此結(jié)果作出判斷。
所有上述處理方法均應(yīng)記錄在案。
2.12.16 每皿平均菌落數(shù)取到小數(shù)點后1位。
2.12.17 動態(tài)監(jiān)測時每點疊放多個平皿或采用可自動切換的儀器，每點應(yīng)采滿4h以上，每皿可采30min。當只放1個皿時，可少于4h，但不可少于1h。
2.13 表面染菌密度的檢測
表面染菌密度檢測應(yīng)符合下列要求：
2.13.1 對于潔凈室內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)、設(shè)備等表面的微生物采樣，應(yīng)采用無菌棉拭子擦抹法，當表面很大，硬且平時，也可采用接觸皿法。
2.13.2 用規(guī)格板標定出面積為25cm2的區(qū)塊，對于圍護結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)不少于4塊，對于設(shè)備，每件不少于2 塊，取樣地點均協(xié)商確定。
2.13.3 將無菌棉拭于含10mL稀釋液試管中浸濕，于管壁上擠干后，對一區(qū)塊擦抹采樣，橫豎往返8次。每一區(qū)塊使用1根無菌棉拭。采樣后，以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管中，經(jīng)電動混勻器震蕩20s或在手掌振打200次。
2.13.4 取含菌液體1.0mL，以瓊脂灌注法接種平皿，每個樣本接種2個平皿，于（35～37）℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（24～48）h后計數(shù)。
2.13.5 必須將本次檢測所用的稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等留樣作陰性比照。
2.13.6 具體事項遵照衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》執(zhí)行。
2.13.7 對于使用接觸皿采樣的表面，以無菌操作方式，先將培養(yǎng)基注入硬質(zhì)或軟質(zhì)φ55平皿，使培養(yǎng)基表面高出培養(yǎng)皿周邊，測試時，將培養(yǎng)皿倒過來，使培養(yǎng)基表面均勻牢固地按壓住整個區(qū)域5s，不得有環(huán)形或線性的運動。
2.13.8 對于圍護結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)應(yīng)用不少于4個培養(yǎng)皿按壓，對于設(shè)備，每件用不少于2個培養(yǎng)皿按壓。
2.13.9 按壓取樣后的培養(yǎng)皿，應(yīng)在2h之內(nèi)，于（35～37）℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（24～48）h后計數(shù)。
2.13.10 菌類平均數(shù)取到小數(shù)點后1位。
