潔凈室（區(qū)）檢測(cè)與抗疫（二）——生物安全實(shí)驗(yàn)室（PCR）
2020年1月新型冠狀病毒進(jìn)入了大家的視野，直至發(fā)文期間，新型冠狀病毒已變異為“德?tīng)査?，?jīng)過(guò)近一年半的抗疫之后，疫情仍具有很大的不確定性，在抗疫的過(guò)程中潔凈室（區(qū)）扮演了哪些重要角色呢？
本期著重講解在抗疫過(guò)程中承擔(dān)著重要角色的PCR實(shí)驗(yàn)室，并對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境控制要求及檢測(cè)方法進(jìn)行詳細(xì)闡述
1、定義：
1.1生物安全實(shí)驗(yàn)室：通過(guò)防護(hù)屏障和管理措施，達(dá)到生物安全要求的微生物實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，包括主實(shí)驗(yàn)室及其輔助用房。
1.2實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)：是指生物風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較大的區(qū)域，對(duì)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的嚴(yán)密性、氣流流向等有要求的區(qū)域。
1.3實(shí)驗(yàn)室輔助工作區(qū)：指生物風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小的區(qū)域，也指生物安全實(shí)驗(yàn)室中防護(hù)區(qū)域以外的區(qū)域。
1.4主實(shí)驗(yàn)室：是生物安全實(shí)驗(yàn)室中污染風(fēng)險(xiǎn)的房間，包括實(shí)驗(yàn)操作間、動(dòng)物飼養(yǎng)間、動(dòng)物解剖間等，主實(shí)驗(yàn)室也稱核心工作間。
1.5緩沖間：設(shè)置在被污染概率不同的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的密閉室。需要時(shí)，可設(shè)置機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，其門具有互鎖功能，不能同時(shí)處于開(kāi)啟狀態(tài)。
2、質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局、住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部于2011年12月5日發(fā)布《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》GB 50346-2011，并于2012年5月1日實(shí)施。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物安全實(shí)驗(yàn)室在設(shè)計(jì)、施工和驗(yàn)收方面滿足實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求，適用于新建、改建和擴(kuò)建的生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、施工和驗(yàn)收。
3、PCR實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)室處理對(duì)象的生物危害程度和采取的防護(hù)措施，生物安全實(shí)驗(yàn)室分為四級(jí)。微生物生物安全實(shí)驗(yàn)室可采用BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示相應(yīng)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室；動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室可采用ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示相應(yīng)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室。
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分級(jí) |
生物危害程度 |
操作對(duì)象 |
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一級(jí) |
低個(gè)體危害，低群體危害 |
對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，不具有對(duì)健康成人、動(dòng)植物致病的致病因子 |
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二級(jí) |
中等個(gè)體危害，有限群體危害 |
對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對(duì)健康成人、動(dòng)物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害。有有效的預(yù)防和治療措施 |
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三級(jí) |
高個(gè)體危害，低群體危害 |
對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危害性，通過(guò)直接接觸或氣溶膠使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致命疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防和治療措施 |
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四級(jí) |
高個(gè)體危害，高群體危害 |
對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危害性，通過(guò)氣溶膠傳播途徑或傳播途徑不明，或未知的、高度危險(xiǎn)的致病因子。沒(méi)有預(yù)防和治療措施 |
PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所操作致病性生物因子的傳播途徑可分為a類和b類。a類至操作非經(jīng)空氣傳播生物因子的實(shí)驗(yàn)室；b類指操作經(jīng)空氣傳播生物因子的實(shí)驗(yàn)室。b1類生物安全實(shí)驗(yàn)室指可有效利用安全隔離裝置進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)室；b2類生物安全實(shí)驗(yàn)室指不能有效利用安全隔離裝置進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)室。
根據(jù)以上分類可知，進(jìn)行核酸檢測(cè)的生物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)滿足三級(jí)b類，即BSL-3中的b1類。
4、主實(shí)驗(yàn)室主要技術(shù)參數(shù)要求
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級(jí)別 |
參數(shù)名稱 |
計(jì)量單位 |
限值范圍 |
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BSL-3中的b1類 |
相對(duì)于大氣的負(fù)壓 |
Pa |
-40 |
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與室外方向上相鄰相通房間的負(fù)壓差 |
Pa |
-15 |
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潔凈度級(jí)別 |
— |
7或8 |
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換氣次數(shù) |
次/h |
15或12 |
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溫度 |
℃ |
18～25 |
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相對(duì)濕度 |
% |
30～70 |
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噪聲 |
dB(A) |
≤60 |
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平均照度 |
lx |
300 |
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維護(hù)結(jié)構(gòu)嚴(yán)密性（包括主實(shí)驗(yàn)室及相鄰緩沖間） |
— |
所有縫隙應(yīng)無(wú)可見(jiàn)泄漏 |
三級(jí)PCR實(shí)驗(yàn)室其他房間的主要技術(shù)指標(biāo)
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房間名稱 |
潔凈度級(jí)別 |
換氣次數(shù) （次/h） |
與室外方向上相鄰相通房間的負(fù)壓差 （Pa） |
溫度 （℃） |
相對(duì)濕度（%） |
噪聲[dB(A)] |
照度 （lx） |
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主實(shí)驗(yàn)室的緩沖間 |
7或8 |
15或12 |
-10 |
18～27 |
30～70 |
≤60 |
200 |
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隔離走廊 |
7或8 |
15或12 |
-10 |
18～27 |
30～70 |
≤60 |
200 |
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準(zhǔn)備間 |
7或8 |
15或12 |
-10 |
18～27 |
30～70 |
≤60 |
200 |
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防護(hù)服更換間 |
8 |
10 |
-10 |
18～26 |
—— |
≤60 |
200 |
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防護(hù)區(qū)內(nèi)的淋浴間 |
—— |
10 |
-10 |
18～26 |
—— |
≤60 |
150 |
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非防護(hù)區(qū)內(nèi)淋浴間 |
—— |
—— |
—— |
18～26 |
—— |
≤60 |
75 |
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化學(xué)淋浴間 |
—— |
4 |
-10 |
18～28 |
—— |
≤60 |
150 |
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清潔衣物更換間 |
—— |
—— |
—— |
18～26 |
—— |
≤60 |
150 |
注：當(dāng)在準(zhǔn)備間安裝生物安全柜時(shí)，噪聲不應(yīng)超過(guò)68dB(A)。
5、檢測(cè)方法：
5.1圍護(hù)結(jié)構(gòu)嚴(yán)密性檢測(cè)
在所有可見(jiàn)縫隙處使用人工發(fā)煙，觀察可見(jiàn)縫隙煙霧的流向判斷是否存在泄漏。
5.2相對(duì)于大氣的負(fù)壓差檢測(cè)
關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室所有門窗，按照由外向內(nèi)的方向逐個(gè)測(cè)量相鄰房間的靜壓差，計(jì)算得出負(fù)壓差。
5.3潔凈度級(jí)別的檢測(cè)
參照《潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范》GB 50591-2010附錄E.4微粒計(jì)數(shù)濃度的檢測(cè)。
5.4換氣次數(shù)檢測(cè)
在室內(nèi)通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行的條件下進(jìn)行。測(cè)量風(fēng)口風(fēng)量或風(fēng)速時(shí)，風(fēng)口上的配件應(yīng)保持原樣。
采用風(fēng)量罩直接測(cè)試送風(fēng)口風(fēng)量，用風(fēng)罩口完全罩住風(fēng)口，風(fēng)罩面積應(yīng)與風(fēng)口面積相適應(yīng)，風(fēng)罩邊與接觸面應(yīng)嚴(yán)密無(wú)泄漏。當(dāng)送風(fēng)口面積超過(guò)風(fēng)量罩面積時(shí)，可將送風(fēng)口分成若干區(qū)域，使用風(fēng)罩分別對(duì)其測(cè)量后求和。使用風(fēng)速儀測(cè)量送風(fēng)口平均風(fēng)速乘以截面積計(jì)算出送風(fēng)口風(fēng)量，通過(guò)總的送風(fēng)量乘以房間容積計(jì)算出換氣次數(shù)。
5.5溫濕度檢測(cè)
參照《潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范》GB 50591-2010附錄E.5溫濕度的檢測(cè)。
5.6噪音檢測(cè)
測(cè)點(diǎn)距地面高1.1m。面積在15㎡以下的房間，可只測(cè)室中心一點(diǎn)，15㎡以上的房間除中心1點(diǎn)外，應(yīng)再測(cè)對(duì)角4點(diǎn)，距測(cè)墻各1m，測(cè)點(diǎn)朝向各角。
5.7照度檢測(cè)
室內(nèi)照度應(yīng)在室溫趨于穩(wěn)定后進(jìn)行，并且熒光燈已有100h以上使用期，檢測(cè)前已點(diǎn)燃15min以上，白熾燈已有10h以上使用期，檢測(cè)前已點(diǎn)燃5min以上。測(cè)點(diǎn)距離地面高0.8m，按1m～2m間距布點(diǎn)，30㎡以內(nèi)的房間測(cè)點(diǎn)距墻面0.5m，超過(guò)30㎡的房間，測(cè)點(diǎn)離墻1m。
小結(jié)：生物安全實(shí)驗(yàn)室能夠符合其環(huán)境控制要求對(duì)于將病原體控制在屏障區(qū)起著至關(guān)重要的作用，定期開(kāi)展對(duì)生物安全實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能夠?qū)⑿孤┓阑加谖慈唬股锇踩珜?shí)驗(yàn)室能夠更好的將操作者與被操作對(duì)象保持有效隔離，將醫(yī)護(hù)人員的感染風(fēng)險(xiǎn)降至。
